表面活性剂S9(Tetronic 1307)在免疫层析试纸中的应用,
2025-02-18 16:35:38 点击:
Tetronic 1307是一种聚醚嵌段共聚物(Poloxamer),属于非离子型表面活性剂,由聚氧乙烯(PEO)和聚氧丙烯(PPO)组成的四臂星形结构。在免疫层析(如侧向层析试纸条,LFIA)中,Tetronic 1307因其独特的物理化学性质被广泛应用于多个关键步骤,以下是其具体应用及作用机制:
1. 样品预处理与裂解**
在免疫层析中,Tetronic 1307常用于样品垫(sample pad)的处理,作用包括:
- **细胞膜裂解**:通过破坏细胞膜或病毒包膜,释放目标抗原(如病毒蛋白、激素等),提高检测灵敏度。
- **抑制非特异性结合**:减少样本中脂质、蛋白质或其他杂质与标记抗体或膜的干扰性结合,降低背景信号。
- **增强流动性**:调节样品垫的亲水性,确保样本均匀、稳定地迁移至结合垫。
2. 标记抗体的稳定剂**
在胶体金(或荧光微球/乳胶微球)标记抗体的过程中,Tetronic 1307作为稳定剂:
- **防止纳米颗粒聚集**:通过空间位阻效应(steric hindrance)维持胶体金或荧光颗粒的分散性。
- **保护抗体活性**:在干燥或长期储存过程中,减少抗体变性,保持其抗原结合能力。
3. 封闭剂(Blocking Agent)**
在硝酸纤维素膜(NC膜)的预处理中,Tetronic 1307可用于封闭非特异性结合位点:
- **降低背景噪音**:覆盖膜表面的疏水区域,阻止检测抗体或样本中杂蛋白的非特异性吸附。
- **提高信噪比**:优化检测线(T线)和质控线(C线)的显色清晰度。
4. 流动调节与反应动力学优化**
- **调节表面张力**:通过调整溶液的亲水-疏水平衡,控制样本在膜上的迁移速度,确保抗原-抗体充分反应。
- **增强灵敏度**:优化反应时间,避免“假阴性”结果(如低浓度样本因流速过快未被捕获)。
5. 冻干保护剂**
在需要冻干工艺的试剂中(如某些高稳定性试纸条):
- **维持蛋白结构**:在干燥过程中保护抗体或抗原的构象完整性。
- **延长保质期**:减少环境湿度或温度波动对试剂性能的影响。
**应用案例**
- **病毒检测**:在COVID-19抗原检测试纸条中,Tetronic 1307用于裂解病毒包膜,释放核衣壳蛋白(N蛋白)。- **激素检测**:在妊娠试纸条中,帮助释放尿液中的hCG激素,同时减少尿盐结晶的干扰。
- **食品安全检测**:在毒素(如黄曲霉毒素)检测中,辅助提取复杂食品基质中的目标分子。
**注意事项**
- **浓度优化**:过高浓度可能导致过度裂解(破坏抗体)或流动性异常(如层析速度过慢)。
- **兼容性测试**:需验证与标记物(胶体金/荧光微球)及其他试剂(如Tween 20、BSA)的兼容性。
- **批次稳定性**:不同批次的Tetronic 1307可能存在分子量或EO/PO比例差异,需严格质控。
**总结**
Tetronic 1307在免疫层析中通过裂解、稳定、封闭和调节流动性的多重功能,显著提升检测的灵敏度、特异性和稳定性。其应用需结合具体检测体系(如样本类型、标记物性质)进行配方优化,是免疫层析试剂开发中的关键辅助材料之一。
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